本文上海申安醫療器材廠對野生大豆內生菌進行了研究,野生大豆屬于栽培大豆的近緣種,在我國分布廣泛,是大豆育種極為重要的資源。野生大豆具有承受環境壓力的獨特能力,具有許多優秀的可遺傳性狀。中國野生大豆資源極為豐富,數量巨大,因此也受到許多大豆主產國的高度重視。野大豆的一系列研究也拓寬了大豆育種的方式,關于野生大豆資源的考察和整理前人已經進行了大量的工作。野生大豆的優良抗性主要體現在耐鹽堿、耐重金屬和耐旱等屬性上,這對于提高栽培大豆的抗逆能力有著深遠的意義,但目前對于此方面的研究尚未完善。野生大豆具有豐富的內生菌菌群,這也與其優良的抗逆屬性密不可分。但上海申安醫療器械廠發現傳統的分離方法局限性較大,對野生大豆的菌群認識還不足,近年來隨著科學手段的進步,分子生物學的普及,高通量技術的廣泛應用,對于內生菌的研究也逐步深入,這對于野生大豆內生菌的研究也具有了突破性的進展。
1.分離野大豆內生真菌,篩選促生、抗逆的活性菌株,此方面研究鮮有報道。
2.探究YD-09菌株(鏈格孢屬),已有研究報道其為植物病原菌,但對其可能具有的活性作用以及活性產物的分離篩選研究卻未見報道。
3 主要儀器
高速冷凍離心機JW-2017HR,安徽嘉文儀器裝備有限公司 ;凝膠成像系統SQ-Tanon3500,北京宇艾奇電子科技有限公司;基因擴增儀TCT5,上海領成生物科技有限公司 ;電泳儀DYY-8B,北京市六一儀器廠;干式恒溫器MK-10,杭州奧盛儀器有限公司;LDZX-50KBS立式壓力蒸汽滅菌器,上海申安醫療器械廠;震蕩培養箱HZQ-X100,哈爾濱東聯電子技術開發有限公司;超凈工作臺SW-CJ-4,上海錦屏儀表有限公司 。
上海申安LDZX-50KBS立式壓力蒸汽滅菌器
4野大豆內生真菌的鑒定
4.1 分子生物學鑒定
經分離純化獲得了41株野大豆內生真菌,上海申安醫療器械廠對其進行18SrDNA序列及BLAST比對結果,并將較高同源性的野大豆內生真菌進行整合,其結果表明41株野大豆內生真菌為25種野大豆內生真菌,結果見表1,其中,于植物葉片中分離得到13株野大豆內生菌,于植物莖部分離得到10株野大豆內生菌,于植物根部分離得到2株野大豆內生菌,分屬于 Alternaria Nees(22株)、Bipolaris sorokiniana(1 株)、Chaetomium globosum(1 株)、Pezizomycotina(1株)。
表1 25 種野大豆內生真菌 18srDNA 鑒定結果 Blast 比對

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