高烏頭現代研究表明其具有鎮痛、抗炎、解熱、局麻、抗心律失常等廣泛的藥理作用,臨床上常用于治療類風濕性關節炎和局部鎮痛。因高烏頭有毒,本課題前期用具清熱解毒功效的甘草汁高壓蒸制以確保臨床用藥安全有效,篩選并研究了毒性部位藥效物質基礎。另外對各萃取部位進行了指紋圖譜研究,發現石油醚等部位化學成分豐富,且炮制前后發生了巨大的變化,但炮制前后石油醚部位是否存在藥效差異值得進一步研究。基于此,本研究上海申安醫療器械廠對炮制前后高烏頭的石油醚部分的鎮痛和抗炎活性進行了對比,以期為其譜效關系研究及進一步明確高烏頭炮制減毒存效機制提供實驗依據。
1儀器
LDZX-30KBS立式壓力蒸汽滅菌器(上海申安醫療器械廠產品) ; BP211D 電子天平(德國Sartorius公司) ; RB-200 型智能熱板鎮痛儀( 成都泰盟科技有限公司) 。
2結果
2.1對熱板致小鼠疼痛的影響
給藥30min后,生品石油醚高劑量組與制品石油醚低劑量組痛閾值分別為 (17.23±4.97) ,(15.22±4.86) ; 給藥60min后,生品石油醚高劑量組痛閾值為(20.60±6.74),與空白對照組相比,差異具有統計學意義( P<0.01,P<0.05) ,制品與等劑量生品比較,差異無統計學意義(P>0.05) 。見表1
表1甘草汁蒸制前后高烏頭石油醚部位對熱刺激所致小鼠疼痛的影響
3討論
高烏頭成分復雜,含有生物堿、生物堿、黃酮、甾體、糖苷類等多類化學成分,上海申安醫療器材廠發現目前研究多集中在以高烏甲素為代表的二萜生物堿的藥理作用及成分研究,對弱極性的石油醚部位藥理作用及化學成分研究鮮有報道。高烏頭具有很強的鎮痛抗炎活性,其石油醚部位是否具有抗炎鎮痛活性且甘草汁蒸制前后活性是否還保持?因此本實驗上海申安醫療器材廠采用熱板法和扭體法以及二甲苯致耳腫脹實驗進行鎮痛抗炎試驗,結果顯示,甘草汁蒸制前后高烏頭石油醚部位均具有較強的鎮痛抗炎活性,且其抗炎作用經炮制后作用顯著增強。現代研究表明高烏甲素和冉烏頭堿有一定的抗炎鎮痛作用,而石油醚萃取部位含有該物質這可能是高烏頭石油醚部位具有抗炎、鎮痛效果的原因之一。
高烏頭經甘草汁蒸制后毒性、藥效變化其根源是內在物質基礎發生了改變。課在前期研究中建立了高烏頭生品及炮制品指紋圖譜,發現石油醚萃取部位指紋峰信息最豐富,所含化學成分數目最多(生品36個共有峰、制品26個共有峰) ,同時炮制前后變化明顯。炮制后消失的成分和含量顯著降低的成分是高烏頭表現出“毒性”的物質基礎;炮制后產生大量新的物質,很可能是高烏頭“存效”的物質基礎。因此上海申安認為石油醚部位抗炎鎮痛活性可能是這些化合物共同作用的結果,抗炎活性在炮制后增強可能與炮制后新增的化合物以及炮制后含量增加有一定關系。這可能是高烏頭鎮痛抗炎的物質基礎之一,可以為進一步開展譜-效關系研究奠定基礎。
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