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上海申安論述檢測水質(zhì)大腸菌的方法!

導(dǎo)讀:本文上海申安醫(yī)療器材廠解析了快速檢測水質(zhì)中大腸菌群含量的方法。


返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2019-08-08 16:41【
上海申安總大腸菌群是衡量水質(zhì)狀況的重要指標之一。總大腸菌群包括大腸桿菌、大腸菌等多種長期存在于人體腸道的細菌,因此,在人體糞便中存在大量的總大腸菌群,可以作為水質(zhì)衡量標準,如總大腸菌群含量超過國家標準,則表示水質(zhì)被污染,可能存在致病風(fēng)險。在傳統(tǒng)的水質(zhì)監(jiān)測種,常以多管發(fā)酵法、平板計數(shù)法進行檢測,該方法費時費力,在水樣較多且時間有限的情況下,難以滿足水質(zhì)總大腸菌群快速檢測的要求。1995年,德國學(xué)者FJ·Forg發(fā)明了紙片法,能夠?qū)崿F(xiàn)總大腸菌群的快速檢測,將水質(zhì)檢測時間由多管發(fā)酵法的72h縮短到24h,材料成本大幅度降低,并有效簡化了操作流程,取得了良好的應(yīng)用實踐效果。本文上海申安醫(yī)療器械廠深入研究了紙片法在檢測水質(zhì)總大腸菌群含量測定中的應(yīng)用,并與常規(guī)的平板計數(shù)法進行對比研究。

1紙片法原理
紙片法是以濾紙片、紙膜和膠片等作為培養(yǎng)基載體,并加入適量的氯化三苯四氮(TTC)溶于水中制備成的無色溶液。由于細菌細胞內(nèi)含有脫氫酶,在脫氫酶的作用下,TTC接受氫生成紅色且不溶于水的三苯甲胺,三苯甲胺性狀較為穩(wěn)定且不會自動氧化,能夠使菌落呈現(xiàn)紅色標記。同時,在紙片培養(yǎng)基中加入乳糖和澳甲酚紫,菌群分解乳糖產(chǎn)酸會導(dǎo)致澳甲酚紫產(chǎn)生顏色變化,菌落周圍產(chǎn)生黃圈,大腸菌群菌落呈現(xiàn)紅斑黃圈,以此作為大腸菌落檢測的判定標準。

2試劑與設(shè)備
本實驗采用自制紙片方法,選用中速定性厚濾紙、中速定性薄濾紙,為杭州新華紙業(yè)公司生產(chǎn),采用北京奧博星公司生產(chǎn)的酵母提取物,TTC為上海青析公司生產(chǎn),溴甲酚紫為上海三愛思公司生產(chǎn)。實驗儀器包括:電熱鼓風(fēng)干燥箱DHG-9240A,購于上海智誠分析儀器公司,立式壓力蒸汽滅菌器LDZF-75KB-Ⅱ,購于上海申安醫(yī)療器械廠,S220多參數(shù)測試儀購于梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司


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3結(jié)果與討論
通過平板計數(shù)法、自制紙片和3M紙片進行總大腸菌群檢測,得出結(jié)果如下:
上海申安醫(yī)療器材廠通過對比分析紙片法與平板計數(shù)法,檢測結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)意義,沒有顯著差異。同時,由于自制紙片存在一定的間隙,如菌體處于纖維之間時,可能出現(xiàn)未計數(shù)的情況,由此造成一些情況下紙片法菌群計數(shù)量稍小于平板計數(shù)法。過量TTC試劑對細菌有抑制作用,通過對比研究,自制紙片時培養(yǎng)基中TTC含量應(yīng)控制在80左右。同時,在培養(yǎng)基中加入5mg/mL的葡萄糖和3mg/mL的牛肉浸膏,能夠有效提高自制紙片檢測的靈敏度。與多管發(fā)酵法、平板計數(shù)法相比,紙片法具有攜帶方便、檢測方法簡單、準確度高、成本低等特點,易于消毒保存,便于運輸,加之紙片法使用中沒有廢液、廢氣產(chǎn)生,使用后可焚燒銷毀,大大降低了對環(huán)境的污染,減少了試驗后清洗工作量,適用于實驗條件不滿足的企業(yè)、單位作為水質(zhì)監(jiān)測手段日常使用。
以上內(nèi)容僅供參考。


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