某細胞培養用到的滅菌鍋LDZX-50KBS
導讀:細胞培養實驗需要準備哪些儀器設備和相關試劑耗材呢,立式壓力滅菌器也是不可少的滅菌儀器,上海申安醫療器械廠生產的LDZX-50KBS性價比好,滅菌用儀器。
來源:未知
發布日期:2020-04-09 20:06【大 中 小】
細胞培養等實驗需要用到的儀器都需要哪些呢:包括電子天平,瑞士Mettler Toledo公司;HH-1恒溫水浴鍋;DGG-9140A型電熱恒溫鼓風干燥箱;LDZX-50KBS立式壓力滅菌器;37XC型倒置顯微鏡;生物安全柜;GPST200型CO2恒溫恒濕培養箱;水浴氮吹儀;6890N型氣相色譜儀,美國Agilent公司;全波段酶標儀,美國BioTek公司;NikonECLIPSETi-U熒光倒置顯微鏡,日本Nikon公司,實驗材料:人肝細胞株LO2,購自武漢普諾賽生命科技有限公司;胎牛血清( FBS) ;培養基,均購自以色列Biolnd公司;青霉素、鏈霉素、胰蛋白酶和噻唑藍( MTT) ,均購自北京索萊寶科技有限公司;反棕櫚油酸標準品,購自上海安譜實驗科技股份有限公司;油酸標準品,購自上海阿拉丁試劑有限公司;牛血清白蛋白( BSA) ,購自美國Sigma公司;脂質氧化( MDA) 檢測試劑盒、超氧化物歧化酶( SOD) 活性檢測試劑盒、活性氧( ROS) 檢測試劑盒、BCA檢測試劑盒,均購自碧云天生物技術研究所; 甘油三酯檢測試劑盒、膽固醇檢測試劑盒、油紅染液,均購自南京建成科技有限公司。
實驗方法:細胞培養,將解凍后的LO2細胞加入含FBS、青霉素和鏈霉素的培養基中,置于培養箱中培養,待細胞長至90%時,用磷酸鹽緩沖液洗滌細胞兩次,加入胰蛋白酶、去掉消化液加入培養基將細胞吹至單細胞懸液,分裝到新的培養瓶,放置到培養箱中繼續培養,傳至兩代后用于實驗。消化吹至單細胞懸液,將細胞濃度稀釋到105個/mL,接種于96孔板,每孔加入200μL,每個濃度設置6個平行。將96孔板放至 5%CO2、37℃培養箱中12h,然后加入反棕櫚油酸至不同濃度,脂肪酸儲存液是與不含脂肪酸的結合配制,稀釋成不同濃度用于實驗,另外設置與實驗組BSA濃度相同的對照組。處理24h后加入20μLMTT溶液( 5μg/mL) ,繼續置于37℃ 處理4h,最后去掉處理液加入150μLDMSO,振蕩混勻10min,于490nm測定各組OD值。
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